Bachelor's Thesis

Development and automatization of mini-bioreactors for biotechnology applications

Final Thesis 26.05 MB Appendix 52.09 kB

Author of thesis: Marek Kollár

Acad. year: 2025/2026

Supervisor: prof. Eric Daniel Glowacki, Ph.D.

Reviewer: doc. Mgr. Zdenka Fohlerová, Ph.D.

Abstract:

This bachelor's thesis focuses on the development of low-volume bioreactors for biotechnological applications. The theoretical part provides an overview of existing commercial systems and available alternative solutions, and subsequently focuses on the analysis of sensor technologies suitable for this type of application. It describes the operating principles of selected sensors and evaluates their advantages and disadvantages in the context of monitoring key process parameters.

The practical part describes the implementation of a functional prototype of a mini-bioreactor built on the Raspberry~Pi~5 platform with a custom expansion board. The prototype combines temperature regulation, magnetic stirring, and liquid dosing using peristaltic pumps into a single autonomous unit. An EmStat~Pico potentiostat module was integrated into the system, enabling control of its entire electrochemical part. A pH electrode was connected to demonstrate its functionality. The work also includes a custom amperometric hydrogen peroxide sensor designed and characterized within the project, which together with the pH electrode covers the two fundamental types of electrochemical measurement, and therefore a wide range of additional sensors. Biomass growth can be monitored optically, without the need for sampling.The entire device is operated by custom software with a web interface for data visualization and remote control.

The functionality of the system was verified under laboratory conditions, and the results confirm its readiness for deployment in real cultivation experiments.

Keywords:

mini-bioreactor, amperometric hydrogen peroxide sensor, pH electrode, EmStat Pico potentiostat, Raspberry Pi, PID control, optical density, magnetic stirring, peristaltic pump

Date of defence

16.06.2026

Result of the defence

Defended (thesis was successfully defended)

znamkaAznamka

Grading

A

Process of defence

Student prezentoval výsledky své práce a komise byla seznámena s posudky. Doc. Gumulec položil otázku: Jaký je průtok peristaltických čerpadel a jak jsou kalibrovány? Byl již bioreaktor využit při experimentu? Ing. Šabatová položila otázku: Jaký je rozdíl mezi navrhovanými sondami? Ing. Odstrčilík položil otázku: Jak moc bylo náročné vytvořit vývojovou desku? Student obhájil bakalářskou práci a odpověděl na otázky členů komise a oponenta.

Language of thesis

Slovak

Faculty

Department

Study programme

Biomedical Technology and Bioinformatics (BPC-BTB)

Composition of Committee

Doc. MUDr. Jaromír Gumulec, Ph.D. (předseda)
doc. Mgr. Ing. Karel Sedlář, Ph.D. (místopředseda)
Ing. Kateřina Šabatová (člen)
Ing. Lucie Šaclová, Ph.D. (člen)
Ing. Jan Odstrčilík, Ph.D. (člen)
Ing. et Ing. Michal Nohel (člen)

Supervisor’s report
prof. Eric Daniel Glowacki, Ph.D.

BP Marka Kollára se zabývá návrhem, konstrukcí a ověřením funkčnosti automatizovaného mini-bioreaktoru pro biotechnologické aplikace. Práce splňuje všechny body zadání a v několika ohledech je výrazně překračuje. Praktická část dokumentuje realizaci funkčního prototypu zahrnujícího regulaci teploty, magnetické míchání, peristaltická čerpadla a hlavně elektrochemický modul EmStat Pico, doplněného o vlastní SW rozhraní. Student navrhl a fyzicky vyrobil vlastní rozšiřující desku (HAT) pro Raspberry Pi 5 a vyvinul originální amperometrický senzor peroxidu vodíku na bázi Pruské modři, včetně optimalizace, automatizované kalibrace a ověření stability. Student po celou dobu pracoval s vysokou mírou samostatnosti, technické zručnosti a kreativity, a pravidelně konzultoval postup řešení. BP doporučuji k obhajobě a navrhuji hodnocení A. Points proposed by supervisor: 97

Grade proposed by supervisor: A

Bakalářská práce Marka Kollára se věnuje návrhu a realizaci automatizovaného nízkoobjemového bioreaktoru pro biotechnologické účely. Autor podrobně srovnává existující komerční systémy, a analyzuje různé metody senzorického měření klíčových parametrů kultivace. Praktická část popisuje návrh, konstrukci a ověření funkčnosti automatizovaného bioreaktoru založeného na platformě Raspberry Pi 5 s vlastní rozšiřující deskou. V práci student pracuje i na vývoji vlastního amperometrického senzoru pro detekci peroxidu vodíku a integruje do systému potenciostatický modul pro ovládání elektrochemických měření. Celý prototypový systém je dálkově ovladatelný přes webové rozhraní.

1. Splnění požadavků zadání
Student splnil všechny body zadání. V teoretické části provedl podrobnou rešerši komerčních i otevřených bioreaktorových systémů a srovnal je v přehledných tabulkách. Stejně detailně zpracoval přehled senzorových technologií vhodných pro integraci. V praktické části navrhl, realizoval a ověřil systém mini-bioreaktoru postaveného na platformě Raspberry Pi 5, včetně integrace elektrochemické senzoriky.

2. Prezentační úroveň technické zprávy a její rozsah
Bakalářská práce má rozsah 78 stran (úvod–závěr), což výrazně převyšuje standardy bakalářských prací a svědčí o hloubce provedené práce. Text je logicky členěn do 13 kapitol, které čtenáře provádějí od stavu techniky přes návrh jednotlivých modulů až po finální integraci a testování. Práce je doplněna přehlednými schématy, tabulkami, fotografiemi prototypu a grafy naměřených dat, což zvyšuje její srozumitelnost. Drobné komentáře: např. citlivost H2O2 senzoru by se měla vztahovat na plochu elektrody; nedostatečné informace o stabilitě H2O2 senzoru (o jakou stabilitu se jedná a jaké byly podmínky? atd.)

3. Formální úprava a jazyková úroveň
Práce je napsána ve slovenském jazyce na dobré odborné i stylistické úrovni. Autor v prohlášení uvádí využití AI nástroje pro jazykovou a stylistickou úpravu, a překlad, což se pozitivně projevilo na čtivosti a gramatické správnosti textu. Nicméně i přesto se najdou v textu drobné chyby (např.  str. 27 Ta2O5; str. 37 ood atd.)  Formální úprava odpovídá požadavkům VUT a využívá šablonu v systému LaTeX. Citace jsou v textu uváděny v souladu s normami.

4. Práce s literaturou
Student prokázal nadstandardní schopnost práce s odbornými zdroji. Seznam literatury obsahuje 112 položek, zahrnujících jak prestižní vědecké publikace, tak dokumentaci ke komerčním zařízením. Rešeršní část není pouhým výčtem, ale kritickým srovnáním technických parametrů a principů měření.

5. Odborná úroveň a využitelnost výsledků
Odbornou úroveň bakalářské práce hodnotím jako výbornou. Nicméně za klíčové bych zde viděla zaměření se více na detailnější ověření funkčnosti senzoru na detekci peroxidu v reálných podmínkách. Za realizační výstupy považuji např. vlastní návrh a výroba HAT, výroba a charakterizace amperometrického senzoru H2O2 na bázi pruské modři či softwarová implementace v Pythonu. Výsledkem je funkční vzorek, který je připraven k testování do reálných kultivačních experimentů a představuje solidní základ pro další vývoj.

Souhrnné hodnocení
Práce vykazuje velmi dobrou odbornou úroveň. Student prokázal schopnost efektivně řešit komplexní a netriviální úkoly vyžadující interdisciplinární přístup. Navrhované hodnocení: 98 bodů (A – výborně) Topics for thesis defence:
  1. 1. V kapitole 6.5.4 zmiňujete plány na otestování senzoru H2O2 v reálném médiu. a) O jaké kultivace půjde? Bakteriální, rostlinné či živočišné kultury? b) Které konkrétní složky běžných kultivačních představují největší riziko pro elektrochemické měření peroxidu za vašich podmínek? c) Jakým způsobem bude elektrochemický senzor v případě kultivací chráněn před případnou tvorbou biofilmu? d) Může student diskutovat možnost výskytu kompenzačního mechanismu u většiny buněk na produkci peroxidu, a tedy i možnost detekce spíše nM koncentrací peroxidu, popř. možnost využít tento parametr jako spíše indikátor stresu u buněk?
  2. 2. Lze za vašich podmínek předpokládat vliv použití peristaltické pumpy a otáček míchadla na elektrochemickou detekci peroxidu?
  3. 3. Jaká je reprodukovatelnost vámi připravených elektrod pro detekci peroxidu?
Points proposed by reviewer: 98

Grade proposed by reviewer: A

Responsibility: Mgr. et Mgr. Hana Odstrčilová