Bachelor's Thesis

Optimization of the bock method using yeasts for testing the antimicrobial activity of photocatalytic surfaces

Final Thesis 6.19 MB

Author of thesis: Amelie Jadrníčková

Acad. year: 2025/2026

Supervisor: Ing. Marcela Králová, Ph.D.

Reviewer: Ing. Anna VanLuchene, Ph.D.

Abstract:

This bachelor's thesis deals with the assessment of the antimicrobial activity of photocatalytic surfaces using the block method. The main aim of the work was to determine how the model microorganism yeast, specifically Candida glabrata, reacts to already investigated and functional antibacterial surfaces. Since the morphology of yeast is more complex than the morphology of bacteria, possible different results were expected. Agarose blocks were used as a carrier for the microbial suspension. The so-called resazurin assay was used for the evaluation. Resazurin is reduced to fluorescent resorufin by reaction with viable organisms, which is used for subsequent quantification of microorganisms in the sample. The initial concentration of the C. glabrata microbial suspension was also determined. In this work, several surfaces of polyester fabric with photoactive perylene, PET foil with a photoactive layer of phthalocyanines and biocidal substances were tested. It was found that biocidal substances and photoactive fabrics do not have an antimicrobial effect on C. glabrata. Therefore, the antimicrobial activity of a thin layer of titanium dioxide, which is active only under UV radiation, was tested. C. glabrata is a UV-resistant yeast, therefore, various experimental setup conditions and the suitability of using this microorganism for this type of testing were investigated.

Keywords:

Candida glabrata, block method, resazurin assay, photoactive surface, titanium dioxide, antimicrobial activity, photocatalysis

Date of defence

11.06.2026

Result of the defence

Defended (thesis was successfully defended)

znamkaAznamka

Grading

A

Process of defence

Obhajoba proběhla podle následujícího schématu: prezentace studentky-vyjádření vedoucí/ho-oponentský posudek-reakce na posudek-diskuse s komisí. Studentka přednesla výborný výtah výsledků své bakalářské práce, řádně zodpověděla všechny dotazy oponentské i členů komise, pohotově reagovala na připomínky. V diskusi tak studentka prokázala výbornou schopnost orientace v teoretických i praktických základech problematiky bakalářské práce. Komise zhodnotila její bakalářskou práci celkově jako výbornou. Pekař: Čím se svítí na vzorek? Kozáková: Proč se používá zelené světlo? Enev: Jak dochází k přenosu a vyhodnocení signálu z kamery? Dzik: Jak byla získána kalibrační křivka resazurinové metody? Jak zajistíte, že kamera snímá jen fluorescenční záření?

Language of thesis

Czech

Faculty

Fakulta chemická

Department

Institute of Physical and Applied Chemistry

Study programme

Chemistry for Medical Application (BPCP_CHMA)

Composition of Committee

prof. Ing. Miloslav Pekař, CSc. (předseda)
doc. Ing. Zdenka Kozáková, Ph.D. (člen)
prof. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (místopředseda)
doc. Ing. Vojtěch Enev, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Petr Dzik, Ph.D. (člen)

Supervisor’s report
Ing. Marcela Králová, Ph.D.

Studentka Amélie Jadrníčková vypracovala bakalářskou práci, ve které se zabývá studiem antimikrobiální aktivity fotokatalytických a fotoaktivních povrchů vůči kvasince Candida glabrata. Pro toto hodnocení využívá bločkovou metodu v kombinaci s resazurinovým testem.
Amélie splnila všechny vytyčené cíle své bakalářské práce, sestavila literární rešerši, která poskytuje dostatečný přehled o problematice fotokatalytických a antimikrobiálních materiálů, metodách stanovení viability buněk a principech resazurinového testu. V některých částech by bylo možné zařadit širší diskusi, nicméně rozsah i zpracování rešerše odpovídají požadavkům kladeným na bakalářskou práci.
V průběhu řešení Amélie prokázala velmi dobrý přístup k plnění zadaných úkolů. Pracovala samostatně a pravidelně konzultovala dosažené výsledky. Během experimentální části si osvojila základní mikrobiologické postupy, přípravu vzorků, studium antimikrobiální aktivity fotokatalytických povrchů bločkovou metodou a její následné vyhodnocení pomocí resazurinového testu.
Závěry jsou formulovány jasně a vycházejí z dosažených experimentálních dat. Celkově si Amélie dala se zpracováním své bakalářské práce záležet, a proto hodnotím „výborně“ a práci navrhuji k obhajobě.
Evaluation criteria Grade
Kvalita zpracování výsledků A
Interpretace výsledků, jejich diskuse A
Závěry práce a jejich formulace A
Využívání konzultací při řešení práce A
Celkový přístup k řešení úkolů A
Splnění požadavků zadání A
Studium literatury a její zpracování B
Využití poznatků z literatury B

Grade proposed by supervisor: A

Reviewer’s report
Ing. Anna VanLuchene, Ph.D.

Bakalářská práce se zabývá optimalizací bločkové metody s využitím kvasinky Candida glabrata
pro testování antimikrobiální aktivity fotokatalytických povrchů. Teoretická část práce poskytuje
dostatečný přehled o problematice fotokatalýzy, použitých materiálech i metodách stanovení
životaschopnosti buněk a je podložena relevantními zdroji. Experimentální část je zpracována
pečlivě a systematicky, autorka provedla kalibraci metody, otestovala několik typů fotoaktivních
povrchů za různých podmínek a výsledky přehledně prezentovala a interpretovala. V práci se
vyskytuje řada drobných překlepů, které však neubírají na její relevantnosti a odborné hodnotě.
Celkově se jedná o zdařilou bakalářskou práci, která splňuje požadavky kladené na tento typ
závěrečné práce.
Evaluation criteria Grade
Splnění požadavků zadání A
Logické členění práce A
Kvalita zpracování výsledků A
Interpretace výsledků, jejich diskuse A
Využití literatury a její citace A
Úroveň jazykového zpracování B
Formální úroveň práce – celkový dojem A
Závěry práce a jejich formulace A
Topics for thesis defence:
  1. Jak byla měřena intenzita záření uvedená v Tabulce 1 a bylo osvětlení vzorků homogenní? Na Obrázku č. 8 se jeví osvětlení jako nehomogenní. Jaký vliv může mít případná nehomogenita na reprodukovatelnost výsledků?

Grade proposed by reviewer: A

Responsibility: Mgr. et Mgr. Hana Odstrčilová