Přístupnostní navigace
E-application
Search Search Close
Bachelor's Thesis
Author of thesis: Bc. Adriena Jedličková
Acad. year: 2025/2026
Supervisor: Ing. Markéta Laštovičková, Ph.D.
Reviewer: Ing. Janette Bobáľová, CSc.
Cholesterol and its metabolites play a crucial role in numerous cellular processes, including cellular signalling. Multiple studies show that cellular cholesterol levels may be one of the key factors in the development of cancer, making cholesterol a potential diagnostic marker and therapeutic target. Therefore, this bachelor’s thesis is focused on the development and optimization of an analytical method for the determination of free cholesterol and selected cholesteryl esters in animal cells. Subsequently lipidomic changes in macrophages (specialized cells engulfing and digesting pathogens) and oral squamous cell carcinoma (OSCC; a common malignancy affecting the head and neck region) were studied. The theoretical part of the thesis summarizes methods for lipid isolation and separation, with an emphasis on the cholesterol characterization using liquid chromatography and mass spectrometry (LC-MS). The experimental part involves the optimization of the cultivation conditions of selected cell lines (ARPE, THP-1, OSCC) and subsequent protocol for lipid extraction. To verify the suitability of the chosen analytical method for detecting qualitative and quantitative changes in the lipid profile, extracts from control cells and cells treated with acetylated low-density lipoprotein (AcLDL) were compared using Oil Red staining and LC-MS analysis. Incubation with AcLDL led to increased lipid accumulation, especially in THP-1 macrophages, which was confirmed by both methods. While Oil Red staining demonstrated changes in total lipids and macroscopic cellular alterations, targeted analysis using LC-ESI-QQQ-MS allowed for the precise determination of concentration changes in specific lipid species (e.g. cholesterol ester 18:1). The preliminary data obtained serve as a basis for a standardized protocol intended for further research into cholesterol metabolism and its role in the pathophysiology of OSCC.
cholesterol, cholesteryl esters, cell culture, liquid chromatography, mass spectrometry, oral squamous cell carcinoma
Date of defence
10.06.2026
Result of the defence
Defended (thesis was successfully defended)
Grading
A
Process of defence
Studentka v prezentaci představila náplň a zásadní závěry své bakalářské práce. Následovalo čtení posudků vedoucí a oponentky a byly zodpovězeny položené otázky. V pokračující diskuzi byly položeny dotazy: doc. MVDr. H. Zlámalová Gargošová Ph.D. – Jsou poznatky zjištěné v práci přenositelné na jiné typy karcinomů? doc. Mgr. M. Vašinová Galiová, Ph.D. – Zaměříte se na experimenty vlivu nanočástic Pb na živé organismy? Má expozice vliv na distribuci prvků v metaloproteinech? Proč z původního počtu buněk v počátku dále vyhodnocujete pomocí koncentrací? Jaký je praktický postup získávání cholesterolu z buněk? Studentka odpověděla na všechny doplňující otázky členů komise, které byly v průběhu diskuze k dané problematice vzneseny. Předvedla, že má výborný přehled v řešené problematice, a to jak z teoretického, tak praktického hlediska. Po diskusi následovalo hodnocení závěrečné práce. Studentka prokázala výbornou orientaci v dané problematice i schopnost samostatné prezentace dosažených výsledků.
Language of thesis
English
Faculty
Fakulta chemická
Department
Institute of Chemistry and Technology of Environmental Protection
Study programme
Applied Analytical, Environmental and Forensic Chemistry (BKCP_AAEFCH)
Composition of Committee
doc. MVDr. Helena Zlámalová Gargošová, Ph.D. (předseda) doc. Mgr. Renata Komendová, Ph.D. (člen) doc. Mgr. Michaela Vašinová Galiová, Ph.D. (člen) prof. Ing. Jozef Krajčovič, Ph.D. (místopředseda) doc. Ing. Jitka Malá, Ph.D. (člen)
Supervisor’s reportIng. Markéta Laštovičková, Ph.D.
Grade proposed by supervisor: A
Reviewer’s reportIng. Janette Bobáľová, CSc.
Grade proposed by reviewer: A
Responsibility: Mgr. et Mgr. Hana Odstrčilová